Цель работы: провести электронномикроскопическое исследование биологических образцов как в режиме низкого вакуума, так и в режиме высокого вакуума с нанесением проводящего покрытия.
Теоретический материал
Применение РЭМ для исследования образцов биологического происхождения
Биологические материалы обладают высоким электрическим сопротивлением, поэтому они быстро заряжаются под действием пучка электронов. Кроме того, наблюдается радиационное повреждение поверхности (пузыри, кратеры, сморщивание, темные квадраты растра, утрата частей образца).
Биологические образцы могут быть различными – толстые и тонкие срезы, влажные и обезвоженные образцы, массивные и одноклеточные, замороженные. Для каждой группы используются свои методы пробоподготовки и наблюдения в электронном микроскопе.
В данной работе исследованию подвергаются высушенные (сухие) массивные образцы различной морфологии и происхождения.
Для предотвращения излишней зарядки и повреждения образцы можно исследовать в режиме низкого вакуума, либо наносить на их поверхность тонкое проводящее покрытие, способствующее стоку излишнего зарядка с их поверхности.
Работа с образцами в режиме низкого вакуума
Установить образец (бумага, ткань, резина), добиться высокого вакуума.
Нажать Low Vacuum в панели управления вакуумом (рисунок 1). При этом режим вакуума перейдет из высокого в низкий и будет выполняться откачка камеры образцов.
Установить ускоряющее напряжение 15кВ
Установить в камере образца давление в 30 Па (для влагосодержащих образцов 50-70 Па) . Нажать кнопку Start для откачки.
Исследование проводить в отраженных электронах (BEIW ).
При исследовании необходимо учитывать взаимосвязь параметров давления, зарядки и яркости (рисунок 2)
Рисунок 1 – Панель управления вакуумом
